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ISSN: 2960-8317
479
Artículo de revisión
Determinación de grupo y factor sanguíneo en muertes violentas aplicando
técnicas de laboratorio
Determination of blood group and factors in violent deaths using laboratory
techniques
Daisy Maleny Velasco Moreta*
Universidad Nacional De Chimborazo
Riobamba- Ecuador
daisym.velasco@unach.edu.ec
https://orcid.org/0009-0004-9764-4212
Verónica Paulina Cáceres Manzano
Universidad Nacional De Chimborazo
Riobamba- Ecuador
vcaceres@unach.edu.ec
https://orcid.org/0000-0001-5710-5661
*Correspondencia:
daisym.velasco@unach.edu.ec
Cómo citar este artículo:
Velasco, D., & Caceres, V. (2026).
Determinación de grupo y factor sanguíneo
en muertes violentas aplicando técnicas de
laboratorio. Esprint Investigación, 5(2), 479-
496. https://doi.org/10.61347/ei.v5i2.388
Recibido: 3 de septiembre de 2026
Aceptado: 5 de octubre de 2026
Publicado: 12 de octubre de 2026
Resumen: Las ciencias forenses requieren procedimientos científicos que permitan
caracterizar evidencias biológicas y contribuir al esclarecimiento de muertes violentas. El
objetivo de esta revisión sistemática fue analizar las técnicas de laboratorio utilizadas
para determinar el grupo sanguíneo ABO y el factor Rh en muestras biológicas de interés
forense, considerando sus ventajas, limitaciones y utilidad como herramientas
complementarias en investigaciones de muertes violentas. La revisión se desarrolló
conforme a las directrices PRISMA 2020. Se realizó una búsqueda bibliográfica en Scopus,
PubMed y Redalyc, que incluyó publicaciones en inglés y español entre 2022 y el 18 de
agosto de 2026. Se consideraron investigaciones sobre técnicas serológicas,
inmunohematológicas y moleculares, con aplicación forense directa o potencial. De 129
registros identificados, se incluyeron 18 estudios tras el proceso de selección y evaluación
de elegibilidad. Los resultados identificaron procedimientos convencionales de
aglutinación y técnicas moleculares como PCR, secuenciación genética, NGS, LAMP y
CRISPR/Cas13a. Los métodos serológicos presentaron utilidad para la clasificación
sanguínea inicial, mientras que las técnicas moleculares ampliaron las posibilidades de
caracterización genética y resolución de discrepancias. No obstante, su aplicación estuvo
condicionada por la calidad de las muestras, la validación metodológica y los recursos
tecnológicos disponibles. Se concluyó que la determinación ABO/Rh constituye una
herramienta complementaria para la caracterización de evidencias biológicas, aunque su
limitada capacidad discriminatoria impide establecer por sí sola una identificación
humana concluyente.
Palabras clave: Ciencias forenses, factor Rh, grupo sanguíneo ABO, medicina legal,
técnicas de laboratorio.
Abstract: Forensic sciences require scientific procedures to characterize biological evidence and
contribute to the investigation of violent deaths. The objective of this systematic review was to
analyze the laboratory techniques used to determine ABO blood groups and the Rh factor in
biological samples of forensic interest, considering their advantages, limitations, and usefulness
as complementary tools in investigations of violent deaths. The review was conducted in
accordance with the PRISMA 2020 guidelines. A literature search was performed in Scopus,
PubMed, and Redalyc, including publications in English and Spanish from 2022 to August 18,
2026. Studies addressing serological, immunohematological, and molecular techniques with
direct or potential forensic applications were considered. Of the 129 records identified, 18 studies
were included following the screening and eligibility assessment process. The results identified
conventional agglutination procedures and molecular techniques such as PCR, genetic
sequencing, next-generation sequencing (NGS), loop-mediated isothermal amplification
(LAMP), and CRISPR/Cas13a. Serological methods proved useful for initial blood group
classification, whereas molecular techniques expanded the possibilities for genetic
characterization and resolution of discrepancies. However, their application was influenced by
sample quality, methodological validation, and available technological resources. It was concluded
that ABO/Rh determination represents a valuable complementary tool for characterizing
biological evidence, although its limited discriminatory power prevents it from independently
establishing conclusive human identification.
Keywords: ABO blood group, forensic sciences, laboratory techniques, legal medicine, Rh factor.
Copyright: Derechos de autor 2026 Daisy
Maleny Velasco Moreta, Verónica Paulina
Cáceres Manzano.
Esta obra está bajo una licencia internacional
Creative Commons Atribución-
NoComercial 4.0.
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1. Introducción
Las ciencias forenses comprenden un conjunto de disciplinas que aplican conocimientos, métodos y
técnicas científicas para examinar evidencias relacionadas con hechos de interés judicial. Su finalidad
consiste en proporcionar información objetiva que contribuya al esclarecimiento de acontecimientos, la
identificación de personas y la administración de justicia. Para ello, integran especialidades como la
medicina legal, la genética, la antropología y la criminalística, cuyos procedimientos permiten analizar los
indicios y sustentar técnicamente los informes periciales (Pérez-Leyva & Pérez, 2024; Salgado et al., 2025).
La identificación humana constituye uno de los principales desafíos de las investigaciones forenses,
particularmente cuando los restos biológicos presentan deterioro, fragmentación o alteraciones
derivadas de las condiciones ambientales. Estas circunstancias pueden limitar la aplicación de
procedimientos convencionales y dificultar la obtención de información suficiente para establecer la
identidad de una persona. En consecuencia, el análisis de evidencias requiere integrar métodos
antropológicos, odontológicos, genéticos y serológicos, cuya aplicación complementaria permite
ampliar las posibilidades de caracterización e identificación de restos humanos (Caiza et al., 2024;
Monzón & Estupiñán, 2026; De Almeida & Nungaray, 2026).
Las muertes violentas, asociadas con homicidios, suicidios y accidentes, requieren investigaciones
médico-legales orientadas a determinar la causa, el mecanismo y las circunstancias del fallecimiento.
En estos escenarios, la evaluación de lesiones y la recuperación de indicios biológicos proporcionan
información relevante para interpretar los acontecimientos investigados. Los procedimientos periciales
deben desarrollarse mediante protocolos científicos que garanticen la documentación, conservación y
trazabilidad de los hallazgos, de manera que sus resultados puedan contribuir a los procesos judiciales
(Granda et al., 2024; Khan et al., 2026).
Entre las disciplinas relacionadas con el análisis de evidencias biológicas, la hematología forense
estudia la sangre y sus características como elementos de interés criminalístico. Su aplicación
comprende la identificación de indicios hemáticos, la evaluación de sus propiedades y el análisis de su
distribución en los escenarios investigados. Estas actividades pueden contribuir a la reconstrucción de
acontecimientos mediante la interpretación de los patrones sanguíneos, mientras que los
procedimientos serológicos y moleculares permiten obtener información complementaria sobre las
características biológicas de las muestras (Roncato et al., 2023).
La determinación de grupos sanguíneos constituye un procedimiento de caracterización biológica
basado en la identificación de antígenos presentes en la superficie de los eritrocitos. Entre los sistemas
de mayor relevancia se encuentran ABO y Rh, cuyas características están determinadas genéticamente
y presentan variaciones entre individuos y poblaciones. El sistema ABO comprende los grupos A, B,
AB y O, mientras que el sistema Rh incluye diversos antígenos, entre los cuales el antígeno D constituye
el principal referente para la clasificación Rh positiva o negativa (Alqahtani et al., 2024; Khasanova,
2026; Gisbert-Monzón et al., 2023).
En el ámbito forense, la determinación de los sistemas ABO y Rh puede contribuir a la clasificación
de evidencias sanguíneas y a la identificación de incompatibilidades entre muestras analizadas. Sin
embargo, su capacidad discriminatoria es limitada, debido a que numerosos individuos comparten las
mismas características antigénicas. Por consiguiente, estos marcadores no permiten establecer por sí
solos una identificación individual concluyente, aunque pueden proporcionar información
complementaria cuando se integran con procedimientos genéticos y otras técnicas de investigación
criminalística (Jadhao et al., 2022; Rodríguez et al., 2023).
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Las técnicas serológicas convencionales utilizadas para determinar los grupos sanguíneos se
fundamentan en reacciones específicas entre antígenos eritrocitarios y anticuerpos. Entre los
procedimientos empleados se encuentran las pruebas de aglutinación en placa, tubo, microplacas y
columnas de gel, seleccionadas según las características de las muestras y los requerimientos analíticos.
No obstante, su desempeño puede presentar limitaciones ante variaciones en la expresión antigénica,
resultados discrepantes o alteraciones de los componentes sanguíneos, situaciones que requieren
procedimientos complementarios de caracterización inmunohematológica (Alqahtani et al., 2024;
Khasanova, 2026; Saidin et al., 2026).
Los avances de la biología molecular han favorecido el desarrollo de metodologías orientadas a
identificar variantes genéticas relacionadas con los sistemas sanguíneos. Entre estas destacan la
reacción en cadena de la polimerasa (PCR), la amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP), la
secuenciación de nueva generación (NGS) y los sistemas de detección genética basados en
CRISPR/Cas13a. Estos procedimientos permiten complementar la tipificación serológica y ampliar las
posibilidades de caracterización cuando se presentan resultados ambiguos o se requiere información
genética adicional (Choi et al., 2024; Kim et al., 2022; Wei et al., 2024).
La aplicación de técnicas moleculares en investigaciones forenses también permite analizar
determinados marcadores presentes en manchas sanguíneas, muestras biológicas mixtas y materiales
conservados durante periodos prolongados. En este campo, la identificación de variantes del sistema
ABO mediante PCR y el estudio de marcadores combinados de metilación y microhaplotipos
constituyen alternativas para la caracterización de evidencias. Sin embargo, su utilidad depende de las
condiciones del material analizado, la disponibilidad de ADN y la validación de los procedimientos
empleados (Dobosz et al., 2026; Tang et al., 2024; Xia et al., 2026; Aguilar, 2025).
La calidad de las evidencias sanguíneas representa un factor determinante para la confiabilidad de
los resultados obtenidos mediante procedimientos serológicos y moleculares. Las muestras pueden
encontrarse depositadas sobre diferentes superficies, expuestas a condiciones ambientales variables o
sometidas a procesos de degradación durante su almacenamiento. Factores como la humedad, la
temperatura, el tiempo transcurrido y las características del soporte pueden afectar la estabilidad de
los componentes biológicos, por lo que resulta indispensable aplicar procedimientos adecuados de
recolección, conservación y procesamiento (Bertrand-Ndoye et al., 2026; Rey et al., 2026).
La selección de las técnicas analíticas debe considerar la naturaleza de la evidencia, las condiciones de
conservación y las limitaciones de cada procedimiento. Aunque los métodos serológicos permiten caracterizar
determinados antígenos eritrocitarios, las técnicas moleculares ofrecen alternativas para examinar variantes
genéticas asociadas con los sistemas sanguíneos. En ambos casos, la validez de los resultados depende de la
estandarización metodológica, los controles de calidad y la interpretación de los hallazgos conforme al alcance
de cada prueba (Matzhold et al., 2024; Mohammed et al., 2026; Usmani et al., 2024).
A pesar de la disponibilidad de procedimientos serológicos y moleculares, resulta necesario
sistematizar la evidencia científica sobre sus aplicaciones, ventajas y limitaciones en el análisis de
muestras sanguíneas de interés forense. La diversidad de métodos, las diferencias en las condiciones
de conservación y las características de las evidencias pueden dificultar la comparación de resultados
entre investigaciones. Por ello, una revisión sistemática permite examinar las alternativas analíticas
disponibles y establecer su utilidad potencial como herramientas complementarias en investigaciones
relacionadas con muertes violentas.
El objetivo de esta revisión sistemática fue analizar las técnicas de laboratorio utilizadas para
determinar el grupo sanguíneo ABO y el factor Rh en muestras biológicas de interés forense,
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considerando sus aplicaciones, ventajas, limitaciones y utilidad en investigaciones de muertes
violentas. Para alcanzar este propósito, se examinaron los procedimientos serológicos y moleculares
descritos en la literatura científica, con énfasis en sus características analíticas y su contribución a la
caracterización de evidencias sanguíneas.
En correspondencia con el objetivo planteado, la revisión se orientó a responder tres preguntas de
investigación: ¿cuáles son las principales técnicas de laboratorio empleadas para determinar el grupo
sanguíneo ABO y el factor Rh en muestras biológicas de interés forense?; ¿cuáles son las ventajas y
limitaciones de las técnicas serológicas y moleculares utilizadas para su determinación?; y ¿cuál es su
utilidad como herramienta complementaria en investigaciones forenses relacionadas con muertes
violentas?
2. Metodología
La investigación se desarrolló mediante una revisión sistemática de la literatura científica, siguiendo
las recomendaciones de la declaración PRISMA 2020. Este marco permitió estructurar los
procedimientos de identificación, selección, evaluación y síntesis de los estudios relacionados con la
determinación de los sistemas sanguíneos ABO y Rh. Su aplicación se orientó a favorecer la
transparencia y reproducibilidad del proceso de revisión, mediante la documentación sistemática de
las decisiones metodológicas adoptadas (Page et al., 2021).
Criterios de inclusión y exclusión
Se establecieron criterios de inclusión y exclusión para delimitar la selección de los estudios y
garantizar su pertinencia respecto al objetivo de investigación. Se incluyeron artículos científicos
publicados entre 2022 y el 18 de agosto de 2026, en inglés o español, relacionados con la determinación
de los sistemas sanguíneos ABO y Rh mediante técnicas serológicas, inmunohematológicas,
moleculares o tecnologías emergentes. Se consideraron investigaciones que utilizaron muestras
biológicas humanas de interés forense, incluidas muestras post mortem, manchas sanguíneas, material
degradado y muestras experimentales empleadas para desarrollar o validar procedimientos con
aplicación forense directa o potencial.
En relación con el diseño metodológico, se admitieron estudios observacionales, experimentales, de
exactitud diagnóstica, de validación metodológica, modelos predictivos, series de casos y revisiones
narrativas que aportaron información sobre los procedimientos de determinación ABO/Rh y su
utilidad médico-legal. Se excluyeron registros duplicados, editoriales, cartas al editor, resúmenes de
congresos, documentos sin acceso al texto completo y publicaciones ajenas al objeto de estudio.
También se descartaron investigaciones cuya información metodológica resultó insuficiente para
valorar la confiabilidad o aplicabilidad de los hallazgos.
Para estructurar la estrategia de búsqueda y orientar la selección de la evidencia, se utilizó el modelo
PICO. La población comprendió muestras biológicas humanas relacionadas con la determinación de
los sistemas ABO y Rh; la intervención incluyó técnicas serológicas, inmunohematológicas,
moleculares y tecnologías emergentes; el comparador consideró, cuando estuvo disponible, métodos
convencionales frente a procedimientos avanzados. Los resultados contemplaron la determinación
sanguínea, el desempeño analítico, las ventajas, las limitaciones y la utilidad forense de las técnicas
evaluadas (tabla 1).
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Tabla 1
Criterios considerados para cada componente del modelo PICO
Componente
Descripción
P (Población)
Muestras biológicas humanas utilizadas en investigaciones sobre los sistemas ABO y Rh con aplicación
forense directa o potencial, incluidas muestras post mortem, manchas sanguíneas, material degradado
y muestras experimentales empleadas para validar técnicas de laboratorio.
I (Intervención)
Técnicas serológicas, inmunohematológicas, moleculares y tecnologías emergentes utilizadas para
determinar los sistemas ABO y Rh, como aglutinación, PCR, PCR en tiempo real, genotipificación,
NGS, LAMP y CRISPR/Cas.
C (Comparador)
Métodos serológicos convencionales frente a técnicas moleculares o tecnologías avanzadas, cuando los
estudios incluyeron comparaciones metodológicas.
O (Resultados)
Determinación ABO/Rh, desempeño y confiabilidad analítica, identificación de variantes, ventajas,
limitaciones, análisis de muestras complejas y utilidad como evidencia complementaria en
investigaciones forenses.
Estrategia de búsqueda
La búsqueda bibliográfica se realizó en Scopus, PubMed y Redalyc, seleccionadas por su cobertura de
publicaciones relacionadas con las ciencias biomédicas y disciplinas afines. La estrategia se organizó
en tres bloques conceptuales: sistemas sanguíneos ABO y Rh; contexto forense, medicina legal y
evidencias biológicas; y técnicas serológicas, inmunohematológicas y moleculares. Los términos se
combinaron mediante operadores booleanos y se adaptaron a las características de búsqueda de cada
plataforma, conforme a los criterios establecidos.
En Scopus, la búsqueda se restringió a publicaciones en inglés, debido a que durante la exploración
inicial no se identificaron documentos pertinentes en español que cumplieran con los criterios
definidos. En PubMed y Redalyc se emplearon combinaciones de términos relacionadas con el factor
Rh, las muestras post mortem y los procedimientos de laboratorio. Las búsquedas identificaron 90
registros en Scopus, uno en PubMed y 38 en Redalyc, que representaron un total inicial de 129 registros,
antes de la eliminación de duplicados (tabla 2).
Tabla 2
Bases de datos y estrategias de búsqueda bibliográfica
Base de
datos
Cadena de búsqueda
Registros
Scopus
("blood group" OR "Rh factor" OR "ABO typing" OR "blood group determination") AND ("legal
medicine" OR forensic OR "violent death" OR homicide OR "cadaveric blood" OR "postmortem
blood" OR "postmortem samples") AND ("laboratory analysis" OR serology OR "enzyme tests"
OR "blood identification" OR "blood typing methods" OR immunohematology) AND (LIMIT-
TO(PUBYEAR, "2022") OR LIMIT-TO(PUBYEAR, "2023") OR LIMIT-TO(PUBYEAR, "2024") OR
LIMIT-TO(PUBYEAR, "2025") OR LIMIT-TO(PUBYEAR, "2026")) AND (LIMIT-TO(DOCTYPE,
"ar") OR LIMIT-TO(DOCTYPE, "re")) AND (LIMIT-TO(LANGUAGE, "English"))
90
PubMed
(Rh factor) AND (forensic medicine OR violent death OR post-mortem samples) AND
(techniques and procedures)
1
Redalyc
(Rh factor) AND ("violent deaths" OR "legal medicine" OR "homicide") AND (laboratory
techniques) AND (cadaveric blood samples)
38
Total
129
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Evaluación del riesgo de sesgo
La evaluación del riesgo de sesgo se realizó mediante herramientas seleccionadas según el diseño
metodológico de los estudios incluidos. Se empleó SANRA para revisiones narrativas, QUADAS-2
para investigaciones de exactitud diagnóstica, NTP-OHAT para estudios experimentales de
laboratorio, PROBAST para modelos predictivos y AXIS o listas de verificación JBI para estudios
observacionales. Cada investigación se examinó considerando los dominios y criterios
correspondientes al instrumento aplicado, con el propósito de identificar posibles limitaciones
metodológicas que afectaran la confiabilidad de sus resultados.
Métodos de síntesis
La información extraída de los estudios seleccionados se organizó en una matriz comparativa que
incluyó el tipo de muestra biológica, la técnica de laboratorio utilizada, los parámetros de desempeño
analítico y los principales hallazgos. También se registraron las ventajas, limitaciones y aplicaciones
forenses descritas en cada investigación. Esta organización permitió comparar los procedimientos de
determinación ABO/Rh e identificar diferencias metodológicas relacionadas con las características de
las muestras y las condiciones de análisis.
La síntesis de los resultados se desarrolló mediante un enfoque descriptivo y comparativo,
considerando las características de las técnicas serológicas, inmunohematológicas y moleculares
identificadas. Se examinaron sus aplicaciones, ventajas y limitaciones, así como su utilidad potencial
para la caracterización de muestras biológicas de interés forense. Los hallazgos se interpretaron de
acuerdo con el alcance de los estudios incluidos, con énfasis en la determinación ABO/Rh como
procedimiento complementario en investigaciones relacionadas con muertes violentas.
3. Resultados
Selección de los estudios
La selección de las investigaciones se desarrolló conforme a las directrices de PRISMA 2020 (Page et
al., 2021). Durante la identificación se recuperaron 129 registros, distribuidos entre Scopus (n = 90),
PubMed (n = 1) y Redalyc (n = 38). Después de eliminar un registro duplicado, se conservaron 128
documentos para el cribado. De estos, 106 fueron excluidos tras examinar sus títulos, resúmenes y
palabras clave, mientras que 22 avanzaron a la fase de recuperación del texto completo.
Durante la elegibilidad, cuatro documentos no pudieron recuperarse y 18 fueron evaluados
mediante lectura completa. Ninguno de los artículos examinados fue excluido en esta etapa, por lo que
la revisión quedó conformada por 18 investigaciones. La figura 1 presenta el proceso de identificación,
cribado, recuperación, evaluación de elegibilidad e inclusión de los estudios, con sus respectivas
frecuencias y las decisiones adoptadas durante la selección.
Evaluación del riesgo de sesgo
La evaluación metodológica se efectuó mediante instrumentos seleccionados según los diseños de
investigación. Las cuatro revisiones narrativas fueron valoradas con SANRA y obtuvieron resultados
favorables, mientras que los seis estudios clasificados como diagnósticos se examinaron mediante QUADAS-
2, identificándose tres con riesgo bajo, dos moderados y uno alto. Los tres estudios de laboratorio evaluados
mediante NTP-OHAT fueron clasificados con riesgo bajo, de acuerdo con los criterios utilizados en la revisión
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Figura 1
Diagrama de flujo PRISMA 2020
Los dos estudios clasificados como modelos predictivos se evaluaron mediante PROBAST y
presentaron, respectivamente, riesgo moderado y alto. Por su parte, los tres estudios restantes se
examinaron utilizando AXIS y listas JBI, con dos valoraciones moderadas y una baja. En conjunto, la
clasificación utilizada identificó 11 investigaciones con riesgo bajo, cinco con riesgo moderado y dos
con riesgo alto. La figura 2 presenta esta distribución, aunque las valoraciones deben interpretarse
considerando las diferencias entre los instrumentos aplicados.
Figura 2
Distribución de las valoraciones de riesgo de sesgo y calidad metodológica de los estudios incluidos
4
3
3
1
0
2
0
1
1
1
0
1
0
1
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5
SANRA
QUADAS
-2
NTP-
OHAT
PROBAST
AXIS
JBI
Alto riesgo Riesgo moderado Bajo riesgo
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Características generales de los estudios incluidos
Para caracterizar la evidencia científica seleccionada, se examinaron la autoría, el diseño metodológico,
el país de procedencia y las características de las muestras o poblaciones estudiadas. Esta clasificación
permitió identificar investigaciones experimentales, revisiones narrativas, estudios tecnológicos y
series de casos relacionados con los sistemas ABO y Rh. La tabla 3 presenta las características de los 18
estudios incluidos, con el propósito de contextualizar las condiciones en que se desarrollaron y su
relación con el análisis forense.
Tabla 3
Características generales de los estudios incluidos en la revisión sistemática
Autor(es)
Tipo de estudio
País
Características de las muestras o población
Matzhold et al.
(2024)
Experimental de
laboratorio
Austria
Muestras de 100 individuos y seis muestras clínicas
empleadas para evaluar haplotipos ABO mediante técnicas
moleculares.
Rey et al. (2026)
Experimental de
laboratorio
Australia
Ensayos sobre membranas de celulosa y nitrocelulosa para
evaluar la estabilidad de pruebas de agrupamiento sanguíneo.
Saidin et al.
(2026)
Serie de casos
Malasia
Tres casos de subgrupos del fenotipo A, examinados
mediante procedimientos inmunohematológicos
complementarios.
Sainath y
Ramaiyan (2025)
Revisión narrativa
India
Evidencia sobre variantes RhD débiles y métodos serológicos
y moleculares para su caracterización.
Shao et al. (2026)
Experimental
molecular
China
120 individuos examinados mediante secuenciación del gen
ABO y análisis de variantes regulatorias.
Shao et al. (2024)
Experimental
molecular
China
317 donantes de sangre evaluados mediante procedimientos
de genotipificación Rh y secuenciación genética.
Tang et al. (2024)
Experimental forense
China
124 muestras individuales utilizadas para desarrollar
marcadores de metilación sanguínea y microhaplotipos.
Usmani et al.
(2024)
Revisión narrativa
Estados
Unidos
Evidencia sobre genotipificación ABO, control de calidad y
procedimientos moleculares en inmunohematología.
Wei et al. (2024)
Experimental
molecular
China
Muestras biológicas utilizadas para evaluar un procedimiento
CRISPR/Cas13a de identificación de genotipos ABO.
Xia et al. (2026)
Experimental forense
China
Manchas sanguíneas mezcladas de dos individuos,
examinadas mediante procedimientos de separación celular.
Zhou et al. (2024)
Experimental
molecular
China
653 donantes evaluados mediante serología y PCR múltiple
en tiempo real para genotipificación RHC/c.
Arishi et al.
(2025)
Revisión narrativa
Arabia
Saudita
Evidencia sobre avances moleculares aplicados a la
determinación de grupos sanguíneos.
Chakraborti y
Ghosh (2024)
Revisión narrativa
India
Evidencia sobre alteraciones microbianas y discrepancias en
la tipificación serológica ABO forense.
Choi et al. (2024)
Experimental con
aplicación forense
Corea del
Sur
Muestras biológicas simuladas utilizadas para evaluar
técnicas LAMP y PCR en tiempo real.
Dobosz et al.
(2026)
Experimental
molecular
Polonia
Material biológico y muestras preservadas utilizadas para
determinar marcadores ABO y amelogenina mediante PCR.
Jadhao et al.
(2022)
Desarrollo
tecnológico
Australia
402 muestras utilizadas para evaluar el algoritmo RBCeq de
tipificación genética sanguínea.
Kim et al. (2022)
Serie de casos clínicos
Corea del
Sur
Cuatro casos inmunohematológicos examinados mediante
secuenciación de nueva generación.
Li et al. (2026)
Experimental
tecnológico
China
Muestras utilizadas para desarrollar un sensor basado en
grafeno para la detección del grupo sanguíneo ABO.
Nota. La clasificación metodológica corresponde a la información proporcionada en la revisión y requiere cotejo con los diseños declarados
en las publicaciones originales.
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Los estudios presentaron una distribución geográfica concentrada principalmente en Asia, con una
mayor representación de investigaciones desarrolladas en China y Corea del Sur. Estos trabajos
abordaron técnicas de genotipificación, secuenciación y detección molecular de variantes sanguíneas.
También se identificaron publicaciones procedentes de Europa, Oceanía y Estados Unidos,
relacionadas con la validación de procedimientos, el análisis de subgrupos sanguíneos y la
implementación de métodos avanzados de determinación ABO/Rh (Choi et al., 2024; Matzhold et al.,
2024; Shao et al., 2026; Wei et al., 2024).
Desde el punto de vista metodológico, se identificaron principalmente investigaciones
experimentales y de desarrollo tecnológico, acompañadas de revisiones narrativas y series de casos. Las
muestras analizadas comprendieron sangre humana, material procedente de donantes, muestras clínicas
y evidencias biológicas experimentales. Algunos estudios incorporaron manchas sanguíneas mezcladas o
material conservado durante periodos prolongados, lo que permitió examinar aplicaciones potenciales de
los procedimientos en condiciones de interés forense (Dobosz et al., 2026; Tang et al., 2024; Xia et al., 2026).
Técnicas de laboratorio, ventajas, limitaciones y utilidad forense
Para responder a las preguntas de investigación, se compararon los procedimientos de laboratorio
identificados en los estudios incluidos, sus principales ventajas y limitaciones y su posible contribución
a la investigación de muertes violentas. Se consideraron técnicas serológicas, moleculares y tecnologías
emergentes aplicadas a la determinación o caracterización de los sistemas ABO y Rh. La tabla 4
sintetiza los hallazgos individuales, diferenciando las aplicaciones forenses directas de aquellas cuya
utilidad se consideró potencial o complementaria.
Tabla 4
Principales técnicas de laboratorio, ventajas, limitaciones y utilidad forense de los estudios incluidos
Autor(es)
Técnicas empleadas (P1)
Ventajas y limitaciones (P2)
Utilidad forense (P3)
Choi et al. (2024)
LAMP y PCR en tiempo real
para genotipificación ABO.
Rapidez analítica; necesidad de
equipos y validación.
Caracterización ABO de
muestras biológicas simuladas de
interés forense.
Tang et al. (2024)
Marcadores de metilación
sanguínea y microhaplotipos.
Análisis de mezclas; complejidad
técnica y necesidad de validación.
Identificación del origen
sanguíneo y análisis de
contribuyentes.
Xia et al. (2026)
Anticuerpos HNA-1,
citometría de flujo y
microdisección láser.
Separación de componentes de
mezclas; infraestructura
especializada.
Análisis complementario de
manchas sanguíneas mixtas.
Dobosz et al.
(2026)
PCR para determinar
marcadores ABO y
amelogenina.
Análisis de material preservado;
sensibilidad a la degradación del
ADN.
Caracterización genética de
muestras con conservación
limitada.
Chakraborti y
Ghosh (2024)
Revisión de métodos de
serología ABO forense.
Accesibilidad de la serología;
posibles interferencias
microbianas.
Interpretación de discrepancias
en la tipificación ABO.
Wei et al. (2024)
CRISPR/Cas13a para detección
de variantes ABO.
Detección molecular específica;
necesidad de validación analítica.
Aplicación potencial en
caracterización molecular
sanguínea.
Zhou et al.
(2024)
PCR múltiple y
genotipificación RHC/c.
Caracterización de variantes Rh;
posibles discrepancias genotipo-
fenotipo.
Información molecular
complementaria sobre el sistema
Rh.
Shao et al. (2024)
PCR y procedimientos de
genotipificación Rh.
Estudio de variantes; dependencia
de marcadores seleccionados.
Caracterización complementaria
de antígenos Rh.
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Kim et al. (2022)
Secuenciación de nueva
generación.
Caracterización molecular
detallada; costos y complejidad.
Resolución potencial de
discrepancias sanguíneas.
Jadhao et al.
(2022)
Algoritmo RBCeq para
tipificación genética.
Análisis de datos genómicos;
necesidad de información genética
confiable.
Herramienta potencial de
caracterización de grupos
sanguíneos.
Matzhold et al.
(2024)
PCR de largo alcance y
secuenciación para
haplotipificación ABO.
Identificación de variantes
complejas; equipamiento
especializado.
Caracterización molecular
complementaria del sistema
ABO.
Rey et al. (2026)
Ensayos sanguíneos sobre
sustratos de papel.
Posibilidad de análisis accesibles;
influencia del soporte y
almacenamiento.
Aplicación potencial en
procedimientos de
determinación sanguínea.
Saidin et al.
(2026)
Pruebas serológicas para
subgrupos ABO.
Caracterización de fenotipos poco
frecuentes; riesgo de clasificación
discrepante.
Interpretación complementaria
de variantes sanguíneas.
Arishi et al.
(2025)
Revisión de PCR, microarrays,
NGS y genotipificación.
Mayor caracterización genética;
costos de implementación.
Fundamentación de aplicaciones
moleculares potenciales.
Usmani et al.
(2024)
Revisión de genotipificación
ABO y aseguramiento de
calidad.
Resolución de discrepancias;
necesidad de estandarización.
Orientación para implementar
procedimientos moleculares.
Li et al. (2026)
Biosensor de grafeno para
detección sanguínea.
Potencial rapidez; tecnología que
requiere validación adicional.
Posible aplicación futura en
detección ABO.
Sainath y
Ramaiyan (2025)
Revisión de métodos
serológicos y moleculares para
RhD débil.
Caracterización de variantes;
limitaciones de técnicas
convencionales.
Información complementaria
para clasificación Rh.
Shao et al. (2026)
Secuenciación avanzada de
regiones regulatorias ABO.
Identificación de variantes
complejas; análisis especializado.
Caracterización genética
potencialmente aplicable al
ámbito forense.
Nota. P1 = técnicas de laboratorio; P2 = ventajas y limitaciones; P3 = utilidad forense. Las aplicaciones potenciales no equivalen a validaciones
realizadas directamente con evidencias procedentes de muertes violentas.
Principales técnicas empleadas para la determinación ABO y Rh
Los hallazgos identificaron una diversidad de procedimientos analíticos para caracterizar los sistemas
sanguíneos ABO y Rh. Entre las técnicas moleculares se encontraron PCR, LAMP, secuenciación de nueva
generación, secuenciación de largo alcance y detección de polimorfismos mediante CRISPR/Cas13a. Estos
procedimientos permitieron explorar la identificación de variantes genéticas y complementar la
información obtenida mediante métodos serológicos, especialmente ante resultados discrepantes o
necesidades de caracterización molecular detallada (Choi et al., 2024; Matzhold et al., 2024; Wei et al., 2024).
Los procedimientos serológicos conservaron relevancia para la clasificación de antígenos
eritrocitarios, mientras que las investigaciones moleculares se orientaron principalmente a resolver
discrepancias y caracterizar variantes sanguíneas. La secuenciación genética permitió estudiar
subgrupos ABO y otras particularidades inmunohematológicas, y los procedimientos de
genotipificación aportaron información complementaria sobre los antígenos Rh. Estas aplicaciones
evidenciaron diferencias en el alcance de las técnicas, según el tipo de marcador y la finalidad del
análisis (Kim et al., 2022; Saidin et al., 2026; Shao et al., 2024; Zhou et al., 2024).
También se identificaron tecnologías emergentes relacionadas con el desarrollo de biosensores, algoritmos
de tipificación genética y procedimientos especializados de detección molecular. Estas alternativas ampliaron
las posibilidades de procesamiento e interpretación de información sanguínea, aunque sus aplicaciones
dependieron de las condiciones de validación y del equipamiento disponible. En consecuencia, su utilidad
forense se consideró potencial cuando las investigaciones originales no evaluaron directamente muestras
procedentes de escenarios criminalísticos (Jadhao et al., 2022; Li et al., 2026; Usmani et al., 2024).
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Ventajas y limitaciones de las técnicas de laboratorio
Las principales ventajas identificadas en los procedimientos serológicos estuvieron relacionadas con su
accesibilidad y utilidad para la clasificación inicial de grupos sanguíneos. Sin embargo, las investigaciones
documentaron dificultades de interpretación asociadas con variantes antigénicas y posibles discrepancias entre
los resultados. Estas limitaciones adquirieron especial relevancia cuando se consideraron alteraciones
microbianas o fenotipos sanguíneos poco frecuentes, cuya presencia pudo dificultar la asignación convencional
de los grupos ABO y Rh (Chakraborti & Ghosh, 2024; Saidin et al., 2026; Sainath & Ramaiyan, 2025).
Las técnicas moleculares aportaron ventajas para la identificación de variantes genéticas y la
caracterización de muestras que requerían mayor resolución analítica. Los procedimientos basados en PCR
y secuenciación permitieron examinar marcadores específicos y abordar determinadas discrepancias entre
fenotipo y genotipo. No obstante, se identificaron limitaciones relacionadas con los costos, la infraestructura
especializada, la interpretación bioinformática y la calidad del material genético, factores relevantes para su
implementación en laboratorios forenses (Arishi et al., 2025; Matzhold et al., 2024; Usmani et al., 2024).
La estabilidad de las muestras constituyó otro aspecto relevante para interpretar el desempeño de
los procedimientos. Las investigaciones sobre sustratos de papel evidenciaron la importancia de las
condiciones de almacenamiento en los ensayos sanguíneos, mientras que los estudios de material
preservado exploraron procedimientos moleculares aplicables a muestras de conservación limitada.
Estos resultados destacaron la necesidad de considerar las condiciones preanalíticas y las
características del material antes de seleccionar una técnica de determinación sanguínea (Dobosz et al.,
2026; Rey et al., 2026).
Utilidad de los sistemas ABO y Rh en investigaciones forenses de muertes violentas
La evidencia examinada mostró que los sistemas ABO y Rh pueden proporcionar información
complementaria para la caracterización y comparación de muestras biológicas. Los estudios con
aplicación forense directa exploraron la genotipificación ABO, la identificación de marcadores
específicos de sangre y el análisis de evidencias mixtas. Estos procedimientos ampliaron las
alternativas disponibles para examinar material biológico en condiciones complejas, aunque no
sustituyeron los métodos de individualización genética utilizados para establecer la identidad humana
(Choi et al., 2024; Dobosz et al., 2026; Tang et al., 2024).
En las investigaciones relacionadas con mezclas sanguíneas se identificaron aplicaciones dirigidas
a diferenciar componentes celulares y analizar posibles contribuyentes. La combinación de marcadores
específicos de sangre con procedimientos moleculares permitió explorar estrategias complementarias
de caracterización de evidencias biológicas. Sin embargo, estas aplicaciones no demostraron por sí
mismas que la determinación convencional de ABO/Rh permitiera identificar individualmente a los
participantes de una mezcla, por lo que su interpretación requirió considerar el alcance de cada técnica
(Tang et al., 2024; Xia et al., 2026).
Los estudios desarrollados en contextos clínicos y de medicina transfusional aportaron información
sobre variantes sanguíneas y procedimientos de caracterización genética. Aunque sus resultados
presentaron relevancia potencial para el análisis de evidencias, no todos evaluaron directamente
muestras post mortem ni materiales procedentes de muertes violentas. Esta diferencia limitó la
posibilidad de extrapolar sus hallazgos al ámbito criminalístico sin validaciones adicionales,
especialmente cuando las condiciones de conservación y procesamiento de las muestras fueron
distintas (Kim et al., 2022; Sainath & Ramaiyan, 2025; Shao et al., 2026).
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Distribución de las técnicas de laboratorio identificadas
Para complementar la síntesis de las investigaciones, se examinó la distribución de las técnicas de
laboratorio descritas en los estudios incluidos. Esta clasificación consideró los procedimientos
serológicos, moleculares y tecnológicos registrados en la matriz de extracción de información, teniendo
en cuenta que una misma investigación pudo emplear varias metodologías. La figura 3 presenta las
frecuencias de utilización de las técnicas identificadas y permite visualizar la diversidad de
procedimientos asociados con la determinación ABO y Rh.
La distribución presentada en la figura 3 reflejó una presencia importante de procedimientos
moleculares, particularmente aquellos basados en PCR y secuenciación genética. También se
identificaron técnicas de LAMP, CRISPR/Cas13a, citometría de flujo y biosensores, junto con
procedimientos serológicos convencionales. Esta diversidad metodológica evidenció la incorporación
de herramientas especializadas para ampliar la caracterización de los sistemas ABO y Rh, aunque la
frecuencia de utilización no constituyó por sí misma un indicador de superioridad analítica (Choi et
al., 2024; Li et al., 2026; Wei et al., 2024; Xia et al., 2026).
Figura 3
Principales técnicas de laboratorio empleadas para la determinación de los sistemas ABO y Rh con aplicación forense
directa o potencial
Nota. Elaboración propia a partir de los estudios incluidos. Una investigación pudo contribuir a más de una categoría de técnicas.
4. Discusión
Los resultados de esta revisión sistemática evidenciaron que la determinación de los sistemas sanguíneos
ABO y Rh constituye un procedimiento complementario para la caracterización de evidencias biológicas
en el ámbito forense. Los 18 estudios incluidos mostraron una diversidad de metodologías serológicas y
moleculares, orientadas a mejorar la clasificación sanguínea y la identificación de variantes antigénicas
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y genéticas. Sin embargo, su capacidad para individualizar personas continúa siendo limitada frente a
los perfiles de ADN, por lo que sus resultados deben interpretarse juntamente con otras técnicas de
identificación humana (Jadhao et al., 2022; Rodríguez et al., 2023).
En relación con las técnicas convencionales, los procedimientos inmunohematológicos basados en
aglutinación conservaron relevancia por su utilidad en la clasificación inicial de los grupos sanguíneos y
su aplicación en laboratorios especializados. No obstante, su desempeño puede verse comprometido por
discrepancias serológicas, variantes antigénicas y alteraciones de las muestras biológicas, especialmente
cuando presentan condiciones desfavorables de conservación. Estas limitaciones evidenciaron la
necesidad de complementar los resultados serológicos con métodos adicionales cuando la interpretación
no resulte concluyente (Chakraborti & Ghosh, 2024; Khasanova, 2026; Saidin et al., 2026).
Los hallazgos relacionados con las técnicas moleculares mostraron avances en la identificación de
variantes genéticas asociadas con los sistemas ABO y Rh. Choi et al. (2024) evaluaron procedimientos basados
en LAMP y PCR en tiempo real, mientras que Wei et al. (2024) desarrollaron un método de detección de
polimorfismos mediante CRISPR/Cas13a. Por su parte, Zhou et al. (2024) examinaron la genotipificación
RHC/c, y Sainath y Ramaiyan (2025) describieron las dificultades de caracterización del fenotipo RhD débil.
Estos aportes respaldaron la utilidad de los métodos moleculares para complementar la tipificación
convencional, aunque no demostraron una superioridad universal en todas las condiciones analíticas.
Respecto a las ventajas y limitaciones, las investigaciones evidenciaron que las técnicas moleculares
ofrecieron mayores posibilidades de caracterización genética y resolución de determinadas discrepancias
serológicas, aunque su implementación requirió equipos especializados, procedimientos validados y
personal capacitado. En contraste, los métodos convencionales mantuvieron ventajas operativas para la
clasificación sanguínea, pero presentaron limitaciones ante variantes antigénicas y posibles interferencias
biológicas. Por consiguiente, la elección del procedimiento debió considerar el propósito del análisis, las
características de la muestra y los recursos disponibles, en lugar de asumir la superioridad de una
metodología sobre otra (Arishi et al., 2025; Chakraborti & Ghosh, 2024; Usmani et al., 2024).
El análisis de muestras complejas constituyó uno de los principales ámbitos de aplicación potencial de
las tecnologías moleculares en investigaciones forenses. Tang et al. (2024) estudiaron marcadores de
metilación específicos de sangre y microhaplotipos para examinar mezclas biológicas, mientras que
Dobosz et al. (2026) evaluaron la determinación molecular de marcadores ABO en materiales preservados
mediante PCR. Estas investigaciones mostraron posibilidades para caracterizar evidencias que presentan
dificultades analíticas, aunque sus resultados no deben interpretarse como demostración de que la
tipificación ABO/Rh permita identificar individualmente a los contribuyentes de una muestra mixta.
La conservación de las evidencias biológicas representó un factor relevante para interpretar el
desempeño y las limitaciones de las técnicas examinadas. Rey et al. (2026) evaluaron la influencia de
los sustratos y las condiciones de almacenamiento sobre la estabilidad de ensayos de determinación
sanguínea, mientras que Bertrand-Ndoye et al. (2026) abordaron el empleo de micromuestras de
sangre en el contexto de la tanatología forense. En conjunto, estos aportes destacaron la importancia
de considerar las características del material biológico y las condiciones preanalíticas para seleccionar
procedimientos adecuados y evitar interpretaciones que excedan la calidad de la evidencia disponible.
Desde una perspectiva médico-legal, la utilidad de los sistemas ABO y Rh radicó principalmente en
su capacidad para aportar información de clasificación y exclusión, sin constituir pruebas suficientes
de identidad individual. La caracterización sanguínea pudo complementar el análisis de otros
marcadores biológicos y contribuir a orientar procedimientos posteriores de laboratorio. Sin embargo,
la coincidencia de un grupo sanguíneo entre dos muestras no demuestra que procedan de una misma
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persona, debido a la distribución compartida de estos fenotipos en la población. Esta consideración
reforzó la necesidad de interpretar los resultados mediante un enfoque multidisciplinario (Jadhao et
al., 2022; Rodríguez et al., 2023).
Una limitación relevante de la evidencia examinada fue la heterogeneidad de los diseños
metodológicos, las técnicas empleadas y las características de las muestras analizadas. Aunque algunas
investigaciones utilizaron materiales de interés forense, otras se desarrollaron en contextos clínicos,
inmunohematológicos o de validación tecnológica. Esta diversidad restringió la comparación directa del
desempeño de los procedimientos y la extrapolación de sus resultados a investigaciones de muertes
violentas. Por ello, las aplicaciones forenses demostradas debieron distinguirse de aquellas propuestas a
partir de resultados experimentales o clínicos (Kim et al., 2022; Matzhold et al., 2024; Tang et al., 2024).
La interpretación conjunta de los estudios también estuvo condicionada por las diferencias en su
calidad metodológica y por la concentración geográfica de las investigaciones incluidas. Estas
características limitaron la posibilidad de establecer conclusiones generalizables sobre el desempeño
de las técnicas en distintos escenarios forenses. En consecuencia, las futuras investigaciones deberían
priorizar la validación de procedimientos serológicos y moleculares en muestras post mortem,
degradadas y mezcladas, mediante protocolos estandarizados, comparadores apropiados y criterios
explícitos de evaluación analítica.
En síntesis, los hallazgos respaldaron la utilización de la determinación ABO/Rh como herramienta
complementaria para la caracterización de evidencias biológicas, particularmente cuando se integró
con procedimientos genéticos especializados. Las técnicas moleculares ampliaron las posibilidades de
identificación de variantes y análisis de determinadas muestras complejas, mientras que los métodos
serológicos conservaron utilidad para la clasificación sanguínea. No obstante, la evidencia disponible
no permitió establecer que una técnica fuera superior en todos los contextos ni que estos sistemas
sanguíneos sustituyeran los métodos de identificación genética individualizante.
5. Conclusiones
La presente revisión sistemática permitió establecer que la determinación del grupo sanguíneo ABO y
del factor Rh constituyó una herramienta complementaria para la caracterización y comparación de
evidencias biológicas de interés forense. Los 18 estudios incluidos identificaron aplicaciones de estos
marcadores en la clasificación sanguínea y el análisis de muestras complejas. Sin embargo, su
capacidad discriminatoria limitada impidió considerarlos procedimientos suficientes para establecer
una identificación individual concluyente, por lo que su interpretación requirió la integración con
métodos genéticos de mayor poder individualizador.
Las técnicas identificadas comprendieron procedimientos serológicos convencionales y
metodologías moleculares, como PCR, secuenciación genética, genotipificación y sistemas basados en
CRISPR/Cas. Los métodos serológicos mantuvieron utilidad para la clasificación sanguínea inicial,
aunque presentaron limitaciones ante variantes antigénicas y condiciones desfavorables de
conservación. Por su parte, las técnicas moleculares ampliaron las posibilidades de caracterización
genética y resolución de discrepancias, pero su implementación exigió infraestructura especializada,
procedimientos validados y recursos técnicos adecuados.
La utilidad de la determinación ABO y Rh estuvo condicionada por las características de las
muestras, su estado de conservación y la selección del procedimiento analítico. Las investigaciones con
aplicación forense directa aportaron evidencia sobre el análisis de manchas sanguíneas, materiales
preservados y determinadas mezclas biológicas. No obstante, una parte de los estudios procedió de
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contextos clínicos o experimentales, lo que limitó la extrapolación de sus resultados a investigaciones
de muertes violentas. Esta diferencia evidenció la necesidad de interpretar los hallazgos conforme al
alcance de cada investigación.
Los resultados respaldaron la integración de procedimientos serológicos y moleculares como
estrategias complementarias, sin establecer la superioridad universal de una técnica sobre otra. La
heterogeneidad metodológica de los estudios incluidos evidenció la necesidad de desarrollar
investigaciones que evalúen su desempeño en muestras post mortem, degradadas y mezcladas. En
consecuencia, se recomienda fortalecer la estandarización de protocolos, la validación analítica y los
controles de calidad, con el propósito de mejorar la confiabilidad de la caracterización sanguínea en
contextos médico-legales.
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Esprint Investigación
https://rei.esprint.tech
Vol. 5 N° 2, julio-diciembre 2026 (479-496)
ISSN: 2960-8317
Daisy Maleny Velasco Moreta, Verónica Paulina Caceres Manzano
496
Transparencia
Conflicto de interés
Los autores declaran que no existen conflictos de interés de naturaleza alguna como parte de la
presente investigación.
Fuente de financiamiento
Los autores financiaron completamente la investigación.
Contribución de autoría
Daisy Maleny Velasco Moreta: Conceptualización, metodología, software, validación, análisis formal,
investigación, gestión de datos, visualización, redacción - preparación del borrador original, redacción
- revisión y edición, financiamiento, administración del proyecto, recursos, supervisión.
Verónica Paulina Cáceres Manzano: Conceptualización, metodología, software, validación, análisis
formal, investigación, gestión de datos, visualización, redacción - revisión y edición, administración
del proyecto, supervisión.
Los autores contribuyeron activamente en el análisis de los resultados, revisión y aprobación del
manuscrito final
